一九三八年初，侵華日軍即將攻進國都南京。郊外刑場，行刑隊奉命趕在日寇進城之前，對關(guān)押的死囚執(zhí)行槍決。槍聲陣陣，讓一排排即將被處決的死囚們面如土色。這時，國軍寧滬杭特別行動隊隊長馬烽(宋佳倫 飾)中校策馬飛馳趕到刑場，他奉上峰之命組建“025敢死隊”，伺機進入南京展開對日寇打擊，他前來行刑隊在死囚中挑選合格的隊員。經(jīng)過一番精挑細選，5個死囚符合馬烽的要求，他們有足智多謀的“老謀子”麻老五(韓童生 飾)，真實身份是蘇維埃政府軍械部長，代號“密使”；還有代號“獵犬”的中情局高級特工徐飛虎(楊猛 飾)，人稱“玉面殺手”，他專職追蹤“密使”，兩人心照不宣但都沒有暴露真實身份；此外還有擅長飛檐走壁的“飛天大盜”唐人杰(郭鐵城 飾)，抱打不平的“索命判官”強大龍(鐵鶴 飾)，鴉片販子朱大山。馬烽宣讀了總司令交代的“戴罪立功、控制使用、稍有不從、就地正法！”的手諭，5個死囚，雖然心中各有想法，但擺在面前的只有一條路：參加敢死隊在槍林彈雨中戴罪立功撿回自己的這條命。為了活下去，他們紛紛表示愿意聽從馬烽的指揮。辦完手續(xù)，馬烽將隊員帶到藏身的一座民居，一路上，房舍被燒，尸橫遍野，滿目是鬼子燒殺的慘象。6個人行進在瓦礫中心頭格外沉重。馬烽將人員安頓好，趁著夜色前往一座古廟和上峰派來的聯(lián)絡(luò)員接頭。出乎馬烽意外的是上峰新派來的聯(lián)絡(luò)員居然是一別三年、朝思暮想的未婚妻舒雅潔(張小斐 飾)，二人百感交集緊緊地擁抱在一起。其實他們兩人都有另一重身份，他們都是中共地下黨員，馬烽代號“長江一號”，受中共金陵特委領(lǐng)導(dǎo)。馬烽匯報完自己組建完敢死隊的情況，舒雅潔傳達了上級的指示。同時交給他國軍司令部下達給敢死隊的第一個任務(wù)：潛入金陵城二佛寺尋找在教會醫(yī)院工作的美國人約翰和瑪麗醫(yī)生，他們不但親眼目睹了日寇在金陵的大屠殺，還偷偷拍攝了日寇種種暴行的電影膠片。敢死隊必須找到約翰和瑪麗，拿到電影膠片并安全將他們送出金陵城。任務(wù)意義重大，但重返日寇占領(lǐng)的南京，在敵人的眼皮底下找人救人，危險重重，馬烽不免擔心起他的那些“烏合之眾”。于此同時，日軍駐金陵特務(wù)機關(guān)機關(guān)長大島川夫(徐少強 飾)也接到上級密令正在給特務(wù)隊隊長山田次郎(孫興 飾)下達嚴令，務(wù)必將約翰和瑪麗捉拿，繳獲電影膠片。山田次郎接到命令立刻布置全城搜索。馬烽和舒雅潔依依不舍。臨走，舒雅潔交給馬烽兩名年輕的女死囚：一個是金陵百樂門歌廳“勾魂歌女”秦可風(fēng)(朱婷 飾)，她被貪官逼婚而被迫殺人；另一個是出身于慣偷世家的“百變魔女”焦嬌(朱紫汶 飾)。馬烽對兩個女子的加入不情不愿，但舒雅潔告訴他女人有時候能完成男人所不能完成的任務(wù)。馬烽想想，這話也在理，就將她們帶到了民居。兩個年輕漂亮的女隊員的加入，給男隊員帶來了騷動，尤其是念念不忘在臨死前嘗嘗女人滋味的強大龍，眼珠子更是圍著秦可風(fēng)和焦嬌打轉(zhuǎn)，這讓唐人杰和麻老五等人看不順眼。馬烽傳達了任務(wù)，7個人雖然明知九死一生，但為了生存，也只有“鋌而走險”。馬烽嚴令有膽敢違令或試圖逃跑者格殺匆論！眾人不敢懈怠，在馬烽的指揮下，化好妝前往二佛寺。